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Warum verwendet man die Taq-Polymerase?
Das Enzym wird hauptsächlich zur DNA-Vervielfältigung mit Hilfe der Polymerase-Kettenreaktion eingesetzt. DNA-Polymerasen von mesophilen Organismen würden bei Erhitzung während der Polymerase-Kettenreaktion denaturiert und müssten nach jedem Zyklus neu hinzugegeben werden.
Wie funktioniert die Polymerase-Kettenreaktion?
Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR – Polymerase-Chain-Reaction) ist ein künstliches Verfahren zur Vervielfältigung von DNA. Denaturierung: Die DNA wird auf ca. 90°C erhitzt, womit sich die Wasserstoffbrückenbindungen zwischen dem komplementären Basen auflösen. Damit wird die DNA in ihre Einzelstränge aufgetrennt.
Warum hitzebeständige Polymerase bei PCR?
Die DNA-Polymerase, die bei der PCR verwendet wird, stammt aus dem Bakterium Thermus aquaticus. Hierbei handelt es sich um ein Tiefseebakterium aus heißen Quellen, weshalb die Polymerase sehr hitzebeständig ist.
Warum hitzebeständige Polymerase?
Die Taq-Polymerase (kurz Taq) ist die DNA-Polymerase des Bakteriums Thermus aquaticus, dem sie ihren Namen verdankt. Sie ist außerordentlich hitzebeständig, da das Bakterium in Geysiren bei etwa 70 °C lebt.
Was braucht man für die PCR Methode?
Diese vier Zutaten sind: DNA, Primer. Wird als Startermolekül beim Kopieren eines DNA-Abschnittes (PCR) benötigt. , Nukleotide und das Enzym. Man nennt sie auch Biokatalysatoren. Mehr DNA-Polymerase Enzym, welches DNA (DNS) kopieren kann. .
Wie wurde die Polymerase-Kettenreaktion erfunden?
Anfang der 1970er Jahre kam der norwegische Postdoc Kjell Kleppe im Labor von Nobelpreisträger Har Gobind Khorana auf den Gedanken, DNA durch zwei flankierende Primer zu vervielfältigen, jedoch geriet die Idee in Vergessenheit. Die Polymerase-Kettenreaktion selbst wurde 1983 von Kary Mullis erneut erfunden.
Was ist eine Kettenreaktion?
Der Begriff Kettenreaktion bedeutet, dass Produkte eines Reaktionsablaufs für nachfolgende Abläufe verwendet werden. Jeder Reaktionsablauf ( Zyklus) beinhaltet dabei immer drei Reaktionsschritte (Denaturierung, Primerhybridisierung und Amplifikation). Um eine gewünschte DNA Menge zu erhalten, müssen wir aber mindestens 20 dieser Zyklen durchlaufen.
Was ist die DNA-Polymerase bei der PCR?
Die DNA-Polymerase, die bei der PCR verwendet wird, stammt aus dem Bakterium Thermus aquaticus. Hierbei handelt es sich um ein Tiefseebakterium aus heißen Quellen, weshalb die Polymerase sehr hitzebeständig ist.
Was ist der Einsatzbereich der PCR?
Ein weiterer relevanter Einsatzbereich der PCR ist beim Klonieren eines Gens (=Abschnitt, der für ein Protein codiert). Hier wird ein Gen aus einem Organismus entnommen und in einen anderen eingefügt. Für die Vermehrung dieses Gens sorgt die Polymerasekettenreaktion.